液相色譜知識(shí)
        
    
        

                      
        
    
        
        
        
        
        
            
        
                
        
                    
        
                        
        做液相繞不過的關(guān)鍵點(diǎn)
        
                        
        
                            2023-12-04
                            Vink
                            
                                
                                                            
                        
        
                    
        
                    
        
                        
        做液相繞不過的關(guān)鍵點(diǎn)包括：

        1. 流動(dòng)相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
        2. 純度。色譜柱的壽命與大量流動(dòng)相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。
        3. 必須與檢測(cè)器匹配。使用UV檢測(cè)器時(shí)，所用流動(dòng)相在檢測(cè)波長下應(yīng)沒有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測(cè)器時(shí)，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動(dòng)相，以提高靈敏度。
        4. 由強(qiáng)到弱：一般先用90%的乙腈（或甲醇）/水（或緩沖溶液）進(jìn)行試驗(yàn)，這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑（乙腈或甲醇）的比例。
        5. 三倍規(guī)則：每減少10%的有機(jī)溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中，注意觀察各個(gè)峰的分離情況。
        6. 粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：當(dāng)分離達(dá)到一定程度，應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。

        以上關(guān)鍵點(diǎn)在液相色譜分析中具有重要地位，為了獲得準(zhǔn)確的分離結(jié)果，需要嚴(yán)格遵循這些關(guān)鍵點(diǎn)。